在生物体组织内均含有一定量的内源性酶和内源性生物素，如富含血细胞的组织标本有大量具有活性的过氧化物酶，肝、脾、肾、脑及胚胎组织中富含生物素。如采用过氧化物酶检测系统或碱性磷酸酶和NBT/BCIP显色系统进行免疫组织化学染色时．酶的作用是催化底物，使显色剂显色，而组织中的内源性酶同样也能催化底物，使其显色，这就影响免疫组织化学染色的特异性。在使用亲和素试剂的免疫 组织化学染色中，内源性生物素易结合亲和素，形成亲和素一生物素复合物，导致假阳性。所以在染色之前应设法将组织内的内源性酶灭活或将内源性生物素封闭，以保证染色的特异性。