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直链淀粉和支链淀粉的测定(双波长法)

2014-04-18

  一、目的

淀粉一般都是直链淀粉和支链淀粉的混合物。直链淀粉和支链淀粉含量和比例因植物种类而不同,决定着谷物种子的出饭率和食味品质,并影响着谷物的贮藏加工。通过本实验学习掌握双波长测定谷物中直链淀粉和支链淀粉的含量。

二、原理

根据双波长比色原理,如果溶液中某溶质在两个波长下均有吸收,则两个波长的吸收差值与溶质浓度成正比。

直链淀粉与碘作用产生纯蓝色,支链淀粉与碘作用生成紫红色。如果用两种淀粉的标准溶液分别与碘反应,然后在同一个坐标系里进行扫描( 400 - 960 mm) 或做吸收曲线,可以得到图所示结果。

 
图 作图法选择淀粉的测定波长

图中 1 为直链淀粉的吸收曲线, 2 为支链淀粉的吸收曲线。对含有直链淀粉和支链淀粉的未知样品,与碘显色后,只要在选定的波长λ ,λ  , λ  3  ,λ  4  ,处作 4 次比色,利用直链淀粉和支链淀粉标准曲线即可分别求出样品中两类淀粉的含量。

三、仪器、试剂和材料

1. 仪器

(1) 电子分析天平

(2 )索氏脂肪抽提器 1 套

(3 )分光光度计 1 台

(4 ) pH 计

(5 )容量瓶 100ml X 2 , 50ml X 16

(6 )吸管 0.5ml X 1, 2ml X 1, 5ml X 1

2. 试剂

( 1) 乙醚或石油醚(沸程 30-60 ℃)

(2 )无水乙醇

( 3 ) 0.5 ml / L KOH 溶液

( 4 ) 0.1 mol / L HCl 溶液

(5) 碘试剂:称取碘化钾 2.0g, 溶于少量蒸馏水,再加碘 0.2g, 待溶解后用蒸馏水稀释定容至 l00ml.