Dispase 中文名称为中性蛋白酶,也称为分散酶,是一种非特异性的金属蛋白酶,被用来从各种不同组织或器官中消化细胞外基质,释放并制备原代单细胞;或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移;也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团。
该酶已被证实作用迅速有效又温和;
细胞能保持完整,细胞膜无损;
该酶非哺乳动物来源,不含支原体或动物病毒污染;
对于温度、 pH 的改变、以及血清成分都很稳定;
使用螯合剂或稀释就能简单灭活;
酶编号: EC 3.4.24.4
1U 是在检测条件下 1 分释放相当于 1 umol 酪氨酸的 Folin 阳性氨基酸或肽的酶量; DispaseII : ≥0.8 U/mg (37oC ,使用酪蛋白作为底物, pH 7.5) ; 1U Dispase II 基本相当于 600U 日本单位的 Dispase 。
抑制剂: EDTA 、 EGTA 、 Hg2+ 、其他重金属。血清不会抑制酶活性。
用 Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl) 溶解 Dispase 至 10 mg/ml ,使用时用细胞培养液稀释到 0.6-2.4 U/ml 。不推荐高于 2.4 U/ml 的 工作浓度,可用 0.22 um 的无菌滤膜过滤除菌。