1 一般要求
使用螺旋接种仪将样品接种在平板上。样品接种后,菌落即分布在螺旋轨迹上,随半径的增加分布得越来越稀。采用特殊的计数栅格,自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数,即可得到样品中微生物的数量。
2 实验步骤
取制备好的适宜稀释度的样品稀释液,以选定的模式接种于实验所用平板,每个稀释度接种两块平板,接种每一个样品前后均按仪器设定程序对螺旋接种仪进行清洗消毒。
按相同接种模式接种悬浮液作为空白对照。
将平板按标准方法中规定的培养时间和温度进行培养后,计数每个平板菌落数,并记录下来。
3 菌落总数的计算和记录
平板上菌落数符合菌落计数仪规定计数范围的为合适范围。如果两个稀释度的四个平板菌落数均在合适范围内,则将四个平板菌落数的平均值作为每克(毫升)样品中的菌落数;如果只有一个稀释度的两个平板菌落数在合适范围内,则将这两个平板菌落数的平均值作为每克(毫升)样品中的菌落数。
当低稀释度的两个平板菌落数都少于合适范围的下限时,计算这一稀释度两个平板菌落数的平均值作为每克(毫升)样品中的菌落数。给这个数注上星号(*),表明该数是从菌落数在计数范围之外的平板估计所得。当所有平板上的菌落数都超过合适范围的上限时,计算高稀释度两个平板菌落数的平均值作为每克(毫升)样品中的菌落数,给这个数注上星号(*)。如果所有稀释度的平板都没有菌落,则以小于1乘以稀释倍数和接种体积作为每克(毫升)样品中的菌落数,给这个数注上星号(*)。
记录时,只有在换算到每克(毫升)样品中的菌落数时,才能定下两位有效数字,第三位数字采用四舍五入的方法记录。也可将样品的菌落数记录为10的指数形式。
4 结果的表述
根据F.3归档计算出每克(毫升)样品的菌落数,固体样品以CFU/g为单位,液体样品以CFU/mL为单位。